實(shí)時熒光定量PCR儀是分子生物學(xué)中一種強(qiáng)大的工具，其用于定量檢測特定DNA或RNA分子的擴(kuò)增過程的技術(shù)。實(shí)時熒光定量PCR儀則是執(zhí)行這一技術(shù)的平臺，它通過增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機(jī)分析處理系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了對PCR擴(kuò)增過程的實(shí)時監(jiān)控。在擴(kuò)增時，引物利用同位素或熒光素進(jìn)行標(biāo)記，與熒光探針和模板特異性結(jié)合進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增信號通過實(shí)時采集系統(tǒng)輸送到計算機(jī)進(jìn)行分析處理，最終得出量化的實(shí)時結(jié)果。
實(shí)時熒光定量PCR儀的保養(yǎng)需從日常清潔、操作規(guī)范、環(huán)境管理、定期維護(hù)及預(yù)防污染五個方面入手，具體方法如下：
一、日常清潔與保養(yǎng)
儀器表面清潔
定期用軟布蘸取少量清水擦拭儀器表面，清洗后擦干。
若試劑泄漏，需用70%酒精擦拭干凈，避免腐蝕性液體接觸儀器。
注意：清潔前必須關(guān)閉電源并拔掉電源線，禁止使用強(qiáng)腐蝕性或有機(jī)溶劑。
反應(yīng)孔（樣品孔）清潔
灰塵或雜質(zhì)會影響PCR擴(kuò)增和熒光檢測，需每3個月清潔一次。
方法：用吹氣球或洗耳球輕輕吹拭孔內(nèi)灰塵；若孔內(nèi)有熒光物質(zhì)污染，可用移液槍吸取90%酒精浸泡20分鐘，吸出酒精后自然風(fēng)干或電吹風(fēng)吹干。
防護(hù)：不使用時關(guān)閉滑蓋，防止灰塵進(jìn)入。
熱蓋清潔
熱蓋需用酒精或純水定期擦拭，確保溫控性能良好，避免影響反應(yīng)溫度均勻性。
二、操作規(guī)范與注意事項
開關(guān)機(jī)頻率
避免頻繁開關(guān)儀器，兩次開關(guān)間隔時間不低于30秒。
實(shí)驗結(jié)束后，保持待機(jī)狀態(tài)10分鐘（內(nèi)部風(fēng)扇持續(xù)工作），待模塊溫度降至室溫后再關(guān)閉電源，防止熱應(yīng)力損傷。
電源與連接
使用原廠商提供的電源線和通訊線，避免與其他大功率設(shè)備共用插座，防止電壓波動影響運(yùn)行。
建議通過穩(wěn)壓器和UPS（不間斷電源）連接電源，保護(hù)電路并確保試驗結(jié)果穩(wěn)定。
耗材使用
選用熱密封性好的PCR管，避免側(cè)壁和管蓋帶有記號筆標(biāo)記（如需標(biāo)記，僅限8聯(lián)管兩端），防止熒光信號干擾。
實(shí)驗結(jié)束后及時取出PCR管，避免溫度下降導(dǎo)致管蓋冷縮，氣溶膠溢出污染儀器。
三、環(huán)境管理
溫濕度控制
環(huán)境溫度建議18℃-35℃，濕度0-85%。溫度過低可能導(dǎo)致檢測無效（如0℃以下時陽性對照陰性）。
避免儀器暴露于潮濕、高溫或腐蝕性氣體環(huán)境中。
防塵與防干擾
儀器應(yīng)放置在灰塵較少、遠(yuǎn)離水源和熱源的地方，無強(qiáng)磁場干擾。
多臺儀器同時使用時，保持間距≥50cm，降低相互影響。
四、定期維護(hù)與校準(zhǔn)
軟件更新與校準(zhǔn)
定期檢查制造商網(wǎng)站，下載并安裝最新軟件版本，修復(fù)漏洞并提升性能。
根據(jù)儀器型號，每半年至一年進(jìn)行一次熒光校正（如ABI品牌儀器），確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
溫控系統(tǒng)檢查
定期驗證溫度控制的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性，若發(fā)現(xiàn)溫度偏差（如各孔平均溫度差＞1-2℃），需聯(lián)系專業(yè)人員調(diào)整或維修。
濾芯更換
根據(jù)使用頻率，定期更換空氣濾芯，防止灰塵進(jìn)入儀器內(nèi)部，延長電子元件壽命。
更新時間：2025-08-27
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